空氣中懸浮微生物的測定有多種，但其測定的基本過程都是經(jīng)過捕集-培養(yǎng)-計數(shù)的過程。目前普遍采用的是浮游菌和沉降菌的測試方法。浮游菌測試方法是通過收集懸浮在空氣中的生物粒子于專門的培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，以此來判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)。沉降菌測試方法是通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)。
1、檢測要求
（1）檢測前，被測潔凈室的運行狀態(tài)必須在正常狀態(tài)，其溫度、濕度、風(fēng)量、風(fēng)壓及風(fēng)速必須在控制的規(guī)定值內(nèi)；被測試的潔凈室(區(qū))應(yīng)已進行過消毒；同時，潔凈室的測試狀態(tài)必須符合生產(chǎn)工藝的要求，并在測試報告中注明其測試狀態(tài)。
（2）測試人員必須穿戴潔凈服，而且一般不得超過兩個人。
（3）凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運轉(zhuǎn)時間，對單向流如5級（100級）潔凈室或?qū)恿鞴ぷ髋_不得少于10min；對非單向流如7級（10000級）、 8級（100000級）的潔凈室不得少于30min。
（4）采樣點的布置及要求：
a.浮游菌測試時，采樣點位置可以與懸浮粒子測試點相同。工作區(qū)測點位置距地面0.8～1.5m（略高于工作面）；送風(fēng)口測點位置距送風(fēng)面30cm左右。根據(jù)需要可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點。采樣點的布置應(yīng)力求均勻，避免局部區(qū)域過于集中或稀疏。
b.沉降菌測試時，采樣點的位置可以與懸浮粒子測試點相同。工作區(qū)采樣點的位置距地面0.8～1.5m（略高于工作面）；根據(jù)需要可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點，采樣點的布置應(yīng)力求均勻。
2、檢測方法
（1）浮游菌的檢測方法
1）首先應(yīng)對測試儀器、培養(yǎng)皿表面進行嚴格消毒。采樣器進入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于100級潔凈室的采樣器宜一直放在被測房間內(nèi)；用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面，把采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子內(nèi)外消毒干凈；采樣口及采樣管在使用前必須高溫滅菌。
2）采樣者應(yīng)穿戴與被測潔凈室相應(yīng)的潔凈服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手要用消毒劑消毒。
3）開動真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)， 時間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。
4）關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋好蓋子后調(diào)節(jié)采樣器。
5）置采樣口于采樣點后，依次開啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動定時器，根據(jù)采樣量選定采樣時間。
6）全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于30～35℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于45h。
7）用肉眼直接計數(shù)，然后用5～10倍放大鏡檢查，是否有遺漏。若平板上有兩個或兩個以上的菌落重疊，分辨時仍以兩個或兩個以上菌落計數(shù)。
（2）沉降菌檢測方法
1）首先也是對測試儀器、培養(yǎng)皿表面進行嚴格消毒滅菌，在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h觀察，確信無菌后方可使用。
2）一般用Ø90mm的沉降平皿，注人20mL培養(yǎng)基，放在測點處，開蓋暴露30min，將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。然后在30～35℃恒溫培養(yǎng)箱中經(jīng)48h培養(yǎng)為肉眼計菌落數(shù)，并記錄生成的菌落數(shù)CFU，然后用5～10 倍放大鏡檢查，是否有遺漏。若培養(yǎng)皿上有兩個或兩個以上的菌落重疊，分辨時仍以兩個或兩個以上菌落計數(shù)。
3、檢測儀器
（1）浮游菌測試儀器
1）儀器設(shè)備主要有采樣器、真空抽氣泵、培養(yǎng)皿、恒溫培養(yǎng)箱等。
2）微生物采樣器有多種形式，主要有固體撞擊式采樣器、離心式空氣微生物采樣器、氣旋式微生物氣溶膠采樣器、液體沖擊式微生物氣溶膠采樣器、過濾式微生物氣溶膠采樣器、大容量靜電沉降采樣器等。采樣器的選擇應(yīng)考慮采樣器的靈敏度、采樣效率，以及有利于微生物的存活、易于分析粒子大小、 易于操作和使用方便等因素。浮游菌采樣器一般采用狹縫式采樣器和離心式采樣器。
3）狹縫式采樣器(撞擊式采樣器)。各類狹縫式采樣器工作原理都相同。將采集的微生物氣溶膠噴射到緩慢旋轉(zhuǎn)的撞擊板或固體培養(yǎng)基表面上，具有足夠大運量的粒子撞擊到收集板上，而較小粒子由于慣性小在氣流夾攜下流出。每種型號的撞擊式采樣器都有其自身的收集效率。例如國產(chǎn)的THK-201型采樣器，屬于固體慣性撞擊式，打開電源后用真空抽氣，懸浮于空氣中的帶菌粒子被吸入采樣頭的篩孔篩，該采樣器的特點是采樣頭篩孔隙是可調(diào)的，當(dāng)空隙調(diào)小時，可用于采集較小粒子；若要采集大粒子時，可將空隙調(diào)大，從而增大了采樣器的應(yīng)用范圍。
4）離心式采樣器基于離心撞擊原理，當(dāng)采樣器通電后，借助于蝸殼內(nèi)的葉輪高速旋轉(zhuǎn)，能把至少40cm距離以內(nèi)被測的帶菌空氣吸入，在離心力的作用下，空氣中的活微生物粒子加速撞擊到的培養(yǎng)基條上，采樣后的培養(yǎng)基條從蝸殼中取出，經(jīng)過恒溫、定時培養(yǎng)，形成菌落，然后進行菌落計數(shù)。國內(nèi)研制生產(chǎn)的JWC-1型采樣器便是一種性能較好的離心式空氣微生物采樣器，采樣量為40L/min。
（2）沉降菌測試所用的儀器設(shè)備
主要有高壓消毒鍋、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿。培養(yǎng)皿一般采用Ø90mm*15mm的硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿，培養(yǎng)基采用普通肉瓊脂培養(yǎng)基或《中華人民共和國藥典》認可的其他培養(yǎng)基。
4、合格標(biāo)準
國內(nèi)外有關(guān)浮游菌測定的標(biāo)準：
 
國內(nèi)外有關(guān)沉降菌測定的標(biāo)準：